克隆人论文(克隆人论文报告)
1. 克隆人论文报告
体细胞克隆技术是指把动物体细胞经过抑制培养，使细胞处于休眠状态。采用核移植的方法，利用细胞拆合或细胞重组技术，将卵母细胞去核作为核受体，以体细胞或含少量细胞质的细胞核即核质体作为核供体，将后者移入前者中，构建重组胚，供体核在去核卵母细胞的胞质中重新编程，并启动卵裂，开始胚胎发育过程，妊娠产仔，克隆出动物的技术，又可称之为体细胞核移植技术。
详细内容
俄勒冈健康科学大学2007年曾成功制作了猴子的克隆ES细胞。关于人类的ES细胞，前韩国首尔大学教授黄禹锡曾在2004年宣布成功制作，但后被发现是假论文。当时，ES细胞曾被视为再生医疗的“王牌”。不过，2006~2007年京都大学教授山中伸弥研发了仅用体细胞进行基因操作的人工诱导多功能干细胞(iPS细胞)，再加上人类的ES细胞制作比其他哺乳类的困难许多等原因，ES细胞研究热潮逐渐降温。
如果使用患者的体细胞，就可以制作因基因相同而不会出现排异反应的治疗用组织。虽然卵细胞的提供是一大难题，但立花则指出：“比起iPS细胞来，克隆ES细胞也许较少出现基因异常。希望探讨两者的可能性，为再生医疗作贡献。”
研究小组经校内伦理委员会审批后，在美国国内总计接受了由共9名23岁~31岁的女性提供的126个卵细胞。研究小组将122个卵细胞去除细胞核，植入了他人皮肤细胞的细胞核，结果有21个发育到了被称为囊胚(Blastocyst)的阶段。取该组织的一部分进行培养，然后其中共6个成为了ES细胞。促使ES细胞分化成心肌后，研究小组还确认了脉动。此次成功制作的6个ES细胞中，有4个是由同一名女子提供的卵细胞制成的，它们似乎具有某种容易成为ES细胞的特质。
2. 克隆 论文
①得到大量的DNA，虽然PCR也可以，但PCR扩增有出错率、但你每做一次常规的PCR，而且每次都要重新提DNA和RNA才行，而且，PCR反应的试剂盒又不便宜，用PCR来制备大量DNA有点得不偿失。尽管构建克隆载体也存在操作复杂（相对于PCR），成功率不是极高，而且还要筛选，但一旦你重组成功并转入了大肠杆菌，你就可以保存了，你想什么时候用，摇个菌，就可以制备到大量的DNA。
②测序需要。你想转表达，你首先得确定你扩增的目的片段是不是你要的，不要以为你设计了个特异性引物，然后跟你mark的长度就可以确定了，这也只是推测，在科学上不严谨。扩增出的基因片段保险起见或者经费允许，要拿去测序，而一般送测的序列都是构建到载体上的序列，克隆载体上一般也都带有测序引物，已确定这就是你要的那条序列。你要写论文必须要给人真凭实据。
3. 克隆人论文参考文献
“中国克隆之父--童第周
童第周是中国实验胚胎学的主要创始人，中国海洋科学研究的奠基人，生物科学研究的杰出领导者，开创了中国“克隆”技术之先河，被誉为“中国克隆之父”。
1934年，获布鲁斯尔大学哲学博士学位，后到英国剑桥大学作短期访问，年底，不顾日本侵略军即将发动大规模侵华战争的危险，毅然放弃国外可以安心工作和生活的条件，回到中国，任国立山东大学生物系教授。
他对生物学贡献很大，通过对两栖类和鱼类的研究，揭示了胚胎发育的极性现象；通过研究文昌鱼的个体发育和分类地位，在对核质关系的研究中取得重大成果；还首次完成鱼类的核移植研究，为国内完成鱼类异种间克隆和成年鲫鱼体细胞克隆打下基础。
长期以来，童第周一直从事发育生物学的研究。早年，他在脊椎动物、鱼类和两栖动物的卵子发育能力研究方面，有过独特的发现；从20世纪50年代开始，他又特别研究了在生物进化中占重要地位的文昌鱼的卵子发育规律，为国际上提供了系统的重要文献；晚年，他又和美国坦普恩大学牛满江教授等一起，在生物性状遗传中的细胞核和细胞质相互关系的研究方面，取得了创造性的成绩，居于世界先进行列。在这同时，他还在防治海洋有害生物、人工养殖经济水产动物、开拓培育经济鱼类新品种等方面，做出了很大的贡献。。
4. 克隆人论文报告怎么写
“克隆”是从英文“clone”音译而来，在生物学领域有3个不同层次的含义。
在分子水平，克隆一般指DNA克隆(也叫分子克隆)。含义是将某一特定DNA片段通过重组DNA技术插入到一个载体(如质粒和病毒等)中，然后在宿主细胞中进行自我复制所得到的大量完全相同的该DNA片段的“群体”。在细胞水平，克隆是指由一个单一的共同祖先细胞分裂所形成的一个细胞群体。比如，使一个单一细胞在体外的培养液中分裂若干代所形成的一个遗传背景完全相同的细胞集体即为一个细胞克隆。又如，在脊椎动物体内，当有外源物(如细菌或病毒)侵入时，会通过免疫反应产生特异的识别抗体。产生某一特定抗体的所有浆细胞都是由同一个B细胞分裂而成，这样的一个浆细胞群体也是一个细胞克隆。在个体水平，克隆是指基因型完全相同的两个或更多的个体组成的一个群体。比如，两个同卵双胞胎即为一个克隆！因为他／她们来自同一个受精卵细胞，所以遗传背景完全一样。后面要讨论的通过细胞核移植所得到的一个遗传背景完全相同的动物或植物群体也是一个克隆。但是，按此定义，“多莉”并不能说成是一个克隆！因为“多莉”只是孤单的一个。只有当那些英国胚胎学家能将两个以上完全相同的细胞核移植到两个以上完全相同的去核卵母细胞中，得到两个以上遗传背景完全相同的“多莉”时，才能用克隆这个词来描述。所以在那篇发表于1997年2月出版在《Nature》杂志上的轰动性论文中，作者并没有把“多莉”说成是一个克隆。另外，克隆也可做动词用，意思是指获得以上所言DNA、细胞或个体群体的过程。2 DNA克隆 在本世纪50年代初，生物学家对遗传物质的载体是 DNA(而不是以前长期所认为的蛋白质)这一事实已经没有什么疑问了；对DNA的化学组成(4种核苷酸通过磷酸二酯键共价连接而成的长链分子)和分子结构(双螺旋)也有了清楚的认识。但是，对于如何研究分布在这些长链DNA分子上的一个个基因的特异结构和功能却无计可施。70年代中期出现的重组DNA技术使基因研究“柳暗花明”。重组DNA技术是将两段或更多的DNA分子进行特异的切割和重新连接的过程。出现这一技术的关键是限制性内切酶，在细菌中的被发现。有一类限制性内切酶(现在已经有几百种被鉴定)，其中的每一种都可以识别一段特异的DNA序列(一般为4～8个核苷酸组成)，并将所识别序列以特定的方式进行双链切割。在细菌细胞内，这些限制性内切酶的主要作用是破坏(限制)入侵的外来 DNA分子(如病毒 DNA)。细菌可以通过修饰自己的特异DNA序列而防止自身的DNA被限制性内切酶所破坏。重组DNA技术中的另一关键蛋白是能把两段DNA分子连接成一段的所谓DNA连接酶。现在进行DNA克隆的方法多种多样，这里介绍一下其典型的过程(图1)。首先需要获得DNA载体。DNA载体开始是由能够在宿主细胞中自我复制的分子量较小的质粒(为环状)或病毒经过人工改造而成。在过去的30多年的时间内，基于对DNA结构和功能的更多了解，通过重组DNA技术，科学家对DNA载体进行了多种多样的巧妙设计和改造，以适合不同应用的需要。比如，大量用于人类基因组工程研究的酵母人工染色体(YAC)就是基于对酵母染色体的结构和功能的了解而研制的，可以接受很长外源DNA片段的DNA载体。要进行克隆的外源DNA可以来自细胞核中的染色体(即所谓基因组DNA)，也可以来自从信使RNA经反转录而成的cDNA。经限制性内切酶切割的外源DNA片段在DNA连接酶的帮助下即可插入到经相同的限制性内切酶切割的载体DNA中，形成重新组合了的“重组DNA”。重组的DNA转入宿主细胞内后，进行大量复制，从而得到所插入DNA片段的分子克隆。这样得到的DNA克隆可以应用于生物学研究的很多方面，包括对特异DNA的碱基顺序的分析和处理，以及生物技术工业中有价值蛋白质的大量生产等等。3 生物个体的克隆 3．1 细胞分化问题 高等生物的发育是一个奇妙的过程。其中的一个重要方面是细胞的分化现象。受精卵细胞分裂的初期产生的后代细胞之间没有太大的差异。随着发育过程的进行，分裂产生的后代细胞之间逐渐出现差异，到发育成熟时，不同细胞(如神经细胞和肝脏细胞)的形状和功能千差万别。早期的一个假说认为细胞分化是细胞核中的遗传物质DNA不断丢失的结果。在分子生物学家对分化产生的不同细胞DNA进行分析之前，植物细胞的体外培养实验和动物细胞的细胞核移植实验已经将该假说推翻了！ 3．2 植物细胞的全能性 在本世纪50年代，植物学家用胡萝卜为模型材料，研究了分化的植物细胞中遗传物质是否丢失问题。他们惊奇地发现，从一个单一已经高度分化的胡萝卜细胞可以发育形成一棵完整的植株！由此，他们认为植物细胞具有全能性。从一棵胡萝卜中的两个以上体细胞发育而成的胡萝卜群体的遗传背景完全一样，故为一个克隆。如此的植物克隆过程是一个完全的无性繁殖过程！动物细胞是否也具有类似的“全能性”呢？现在还没有任何成功的报道。但用动物细胞进行的细胞核移植实验也同样表明，动物细胞在分化过程中，在大部分情况下并没有遗传物质的丢失和不可逆改变。3．3 用动物细胞进行的细胞核移植实验 1952年，2位美国科学家(罗伯特·布里格斯和托马斯·金)试图在显微镜下将一个发育到后期的豹蛙胚胎细胞的细胞核取出，然后植入到一个已去除细胞核的豹蛙卵细胞中，但遗憾的是，这个经处理的卵细胞并未发育成功。1964年英国科学家格登小心地重复了以上实验，这次他用从发育到蝌蚪期的非洲蟾蜍的肠道或皮肤的上皮细胞中取出细胞核，移植到细胞核被紫外线破坏或被在显微镜下用微细玻璃管吸出的未受精卵细胞中。在有的情况下，卵细胞停止分裂；而另一些情况下，出现了不正常胚胎，只有大约1％～2％经过细胞核移植的卵细胞可以发育到蝌蚪期。但是这些蝌蚪中极少数能够发育到成体。这些实验结果表明，至少部分蝌蚪上皮细胞的细胞核是具有全能性的。在随后的几十年时间内，胚胎学家利用不同的动物(包括牛、羊、鼠等)进行了类似的细胞核移植实验，但都只有用早期的胚胎细胞中的细胞核才可能得到发育到出生的个体。直到1997年，英国胚胎学家维尔穆特报道了将高度分化了的羊乳腺细胞的细胞核移植到去除了细胞核的卵母细胞(还未成熟的卵细胞)中，并得到了一只存活的小羊“多莉”。一年以后，另一组科学家报道了将小鼠卵丘细胞(围绕在卵母细胞外周的高度分化细胞)的细胞核移植到去除了细胞核的卵母细胞中后，得到了20多只发育完全的小鼠。如果多莉因为只有一只，还不够叫做克隆羊的话，这些小鼠就是名副其实的克隆鼠了。下面以小鼠为例简单说明一下通过细胞核移植克隆哺乳动物的基本过程(图2)。3．4 通过细胞核移植克隆小鼠的基本过程 在本实验中，卵丘细胞是经如下过程得到的：通过连续几次注射绒毛膜促性腺激素，使雌鼠诱导成高产卵状态。然后从雌鼠输卵管中收集卵丘细胞与卵母细胞的复合体。经透明质酸处理使卵丘细胞散开。选择直径为10～ 12μm的卵丘细胞用作细胞核供体(前期实验表明，若用直径更小或更大的卵丘细胞的细胞核，经过细胞核移植的卵母细胞很少发育到超过8细胞期)。所选择的卵丘细胞保持在一定的溶液环境中，在3h内进行细胞核移植(与此不同的是，在获得“多莉”时，用作细胞核供体的乳腺细胞先在培养液中传代了3～6次)。卵母细胞(一般处于减数分裂中期Ⅱ)通过与上面描述类似的方法，从不同种的雌鼠中收集。在显微镜下小心地用一直径大约7μm的细管取出卵母细胞的细胞核，尽量不取出细胞质。同样小心取出卵丘细胞的细胞核，也尽量去除所带的细胞质(通过使取出的细胞核在玻璃管中往复运动数次，以去除所带的少量细胞质)。在细胞核被取出后5min之内，直接注射到已经去除了细胞核的卵母细胞中。进行了细胞核移植的卵母细胞先放在一种特制的溶液中1～6h，然后加入二价锶离子(Sr2+)和细胞分裂抑素B。前者使卵母细胞激活，后者抑制极体的形成和染色体的排除。再取出处理过的卵母细胞，放在没有锶和细胞分裂抑素B的特制溶液中使细胞分裂形成胚胎。不同阶段的胚胎(从2细胞期到胚泡期)被分别植入几天前与已经结扎雄鼠交配过的假孕母鼠的输卵管或子宫中发育。发育完全的胎儿鼠在大约19天后通过手术取出。3．5 动物克隆的意义和展望 用分化的羊乳腺细胞或鼠卵丘细胞的细胞核进行的移植实验结果表明，哺乳动物已经高度分化的体细胞中遗传物质没有发生不可逆变化，在一定条件下(去核卵母细胞中)可以重新启动其发育程5. 克隆技术文献
最大区别就是,前者克隆的是灵长类动物,后者克隆的是羊种哺乳动物。前者更接近于我们人类
要说明这个问题，首先就不得不回归于羊和猴本身，猴子本身是灵长类动物，与人类基因有许多相似。灵长类动物在克隆难度上要比普通动物要大的多。事实上，自从1996年英国成功克隆了羊之后，也开始尝试对灵长类动物进行克隆，但是却无一成功。03年美国匹兹堡大学相关研究人员还在权威学术期刊上发布了一篇论文，论文称，用目前的技术来克隆灵长类动物是完全不行的。
10年美国灵长类动物研究中心的著名科学家也尝试对猴子进行克隆，但是在猴子胚胎发育到81天的时候却以流产告终了。克隆猴之所以那么难，一方面是因为灵长类动物的细胞核去核难度比较大，只有把细胞核去掉，外来的体细胞核才能够被原先的细胞所容纳。
第二方面是克隆猴细胞核需要提前激活才能成功进入卵细胞，而且激活的时机需要把握得非常精准，才能让猴细胞核成功进入。但是如果使用传统的方式进行激活。猴类细胞核往往会提前被激活，这就需要研究人员采用不同的方式进行细胞核的激活。
科学家们通过5年的不懈努力，终于攻克了这个生物界难题。通过鉴定，克隆猴“中中”和“华华”的DNA信息完全一致。
如果说科学家仅仅是完成了对灵长类动物的克隆而已，那么确实称不上什么，更重要的是它对人类科学的影响。克隆动物的最终目的还是要回归到人类研究上，但是历来的羊，小鼠克隆，毕竟和人类相距太远。而直接对人进行克隆，又违背伦理道德的。因此通过克隆和人类基因最相近的动物-猕猴，就成了最好的选择。
通过体细胞克隆猴可以建立脑疾病机理研究的脑疾病模型猴，这个模型和人类相似。可以通过这个模型的建立，对脑疾病药物进行效测试。过去大部分脑疾病之所以无法通过药物进行有效治疗，主要因为科学家建立的小鼠模型等和人类相去太远。所以许多研发出的药物在模型身上测试有用，在人类身上测试却大多无效。
不仅是在脑科学领域上，这个模型在许多与基因相关的疾病上，也可以很好地对病理和药物进行研发。可以说，猴类的成功克隆将让人类对这一类疾病的攻克更近一步。
不夸张地说，体细胞克隆猴的成功，不仅会让我国在基因疾病领域领跑世界，也一定会在未来拯救上万的基因疾病患者。
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